含与不含EDTA的胰酶 凋亡用不含EDTA的胰酶

3D设计 heimagongsi 35℃

培养基中加入edta有什么作用?BadValueNum:0,EDTA胰蛋白酶,但在胰蛋白酶中加入了EDTA。正常细胞似乎需要用胰蛋白酶或胶原酶消化,1、2、3的区别主要体现在EDTA上,动物细

培养基中加入edta有什么作用?BadValueNum:0,EDTA胰蛋白酶,但在胰蛋白酶中加入了EDTA。正常细胞似乎需要用胰蛋白酶或胶原酶消化,1、2、3的区别主要体现在EDTA上,动物细胞表面与培养皿结合的很多蛋白质都是带有钙或镁离子的蛋白质,EDTA对钙镁离子有很好的螯合作用,可以更好的辅助胰酶降解相应的蛋白质,消化效率会大大提高。至于没有钙镁离子,想想就知道了,溶液中的钙和镁肯定会削弱胰酶的活性。

不含edta的胰酶包装

1、请教ANNEXINV-PI法检测凋亡的原理和相关试剂盒使用步骤

BIODAI广泛用于检测凋亡细胞5min AnnexinPI,具体步骤如下:1)悬浮细胞:300g,4℃离心5min,收集细胞。贴壁细胞:用不含EDTA的胰蛋白酶消化,300g,4℃离心5min,收集细胞。胰酶消化时间不宜过长(见注意事项),以防假阳性。2)用预冷的PBS洗涤细胞两次,每次在300g和4℃离心5min,收集15×105个细胞。

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2、如何消化培养板里的细胞?

先用PBS洗培养基。用0.1%胰蛋白酶在37℃ CO2培养箱中消化几分钟。然后拿出板子轻轻拍一下,细胞就消化了。然后你在板上加含10%血清的培养基中和胰蛋白酶,再吹几次细胞,让细胞被吹走变成单细胞。如果想直接染色,可以先在板上放一块盖玻片(先用酒精浸泡,再烧制),然后将细胞铺在板上。当细胞铺在盖玻片上时(最好是24小时后),就可以染色了。

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直接在培养皿中染色。在显微镜下不容易观察。如果你染色并观察,把它铺在载玻片上。用缓冲液(就是你培养细胞时一直用的缓冲液)清洗培养板中的细胞。去除培养基,然后用胰蛋白酶消化。你轻轻一吹,基本就是一个单细胞了。可以染色观察,只是细胞还没纺出来。给细胞染色的目的是什么?

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3、请教胰酶使用注意及贴壁细胞的消化

博林克为您解答生物技术:胰酶使用注意事项:1。使用胰酶细胞消化液时,要特别注意避免消化液被细菌污染。2.胰腺细胞的消化液消化细胞的时间不能太长,否则铺好后细胞的生长状态会很差。贴壁细胞的消化:1。吸出培养基,用无菌PBS、Hanks液或无血清培养基洗涤细胞一次,去除残留血清;2.加入少量胰蛋白酶细胞消化液,稍微盖住细胞。根据胰蛋白酶效率的不同,可以增加和减少胰蛋白酶的用量。

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4、细胞培养用的胰蛋白酶自己配置和买的试剂有什么区别?一般0.25%胰蛋白酶...

1与2、3的区别:酚红,主要作为指示剂,用于调节其PH值,从颜色上可以观察到动物细胞转移的胰酶pH值在7.0-7.4之间。1、2、3的区别主要体现在EDTA上。动物细胞表面与培养皿结合的很多蛋白质都是带有钙或镁离子的蛋白质。EDTA对钙镁离子有很好的螯合作用,可以更好的辅助胰酶降解相应的蛋白质,消化效率会大大提高。至于没有钙镁离子,想想就知道了。溶液中的钙和镁肯定会削弱胰酶的活性。

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5、什么样的细胞不能用胰酶-EDTA消化

同意LS癌细胞很少粘在一起是因为癌变后细胞膜表面糖蛋白减少,使用后没有实际作用。细胞之间是由cam(细胞粘性分子)连接的,很多粘性分子只有在二价金属离子存在的情况下才能执行这一功能,比如Ca2、Mg2。植物细胞不能用胰蛋白酶EDTA消化,只能用纤维素酶消化。应该是肿瘤细胞。正常细胞似乎需要用胰蛋白酶或胶原酶消化。

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楼主,你误解了EDTA的作用。EDTA胰酶只是在胰酶中加入EDTA。EDTA是乙二胺四乙酸,一种金属螯合剂。通常与胰蛋白酶联合使用。原因是钙、镁等金属离子会降低胰酶的活性,所以使用胰酶消化液时要添加EDTA。它能螯合这些离子,消除胰酶的抑制作用。

6、在培养细胞时,培养基中加入edta的作用是什么?

细胞培养基中不可能含有EDTA。EDTA会螯合Ca2和Mg2,钙镁离子是细胞粘附和正常生长所必需的,但胰蛋白酶一般含有EDTA来螯合培养基中的这两种离子,以防止钙镁离子对胰蛋白酶活性的抑制,使胰蛋白酶能够消化细胞。